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Es un dispositivo que permite comparar la radiación transmitida o absorbida por una solución que contiene una cantidad desconocida de soluto, y una que contiene una cantidad conocida de la misma sustancia.
Los espectrofotómetros se utilizan en diversas aplicaciones, entre ellas:
Cubetas de espectrofotómetro. En un primer plano, dos de cuarzo aptas para el trabajo con luz ultravioleta; en un segundo plano, de plástico para colorimetría (es decir, empleando luz visible).
Fuente de luz. La fuente de luz que ilumina la muestra. Debe cumplir con las siguientes condiciones: estabilidad, direccionabilidad, distribución de energía espectral continua y larga vida. Las fuentes empleadas son: lámpara de wolframio (también llamado tungsteno), lámpara de arco de xenón y lámpara de deuterio que es utilizada en los laboratorios atómicos.
Monocromador. Se encarga de aislar las radiaciones de longitud de onda deseada que inciden o se reflejan desde el conjunto, se usa para obtener luz monocromática.
Está constituido por las rendijas de entrada y salida, colimadores y el elemento de dispersión. El colimador se ubica entre la rendija de entrada y salida. Es un lente que lleva el haz de luz que entra con una determinada longitud de onda hacia un prisma el cual separa todas las longitudes de onda de ese haz y la longitud deseada se dirige hacia otra lente que direcciona ese haz hacia la rendija de salida.
Compartimiento de Muestra. Es donde tiene lugar la interacción R.E.M con la materia (debe producirse donde no haya absorción ni dispersión de las longitudes de onda). Es importante destacar, que durante este proceso, se aplica la ley de Lambert-Beer en su máxima expresión, en base a sus leyes de absorción, en lo que concierne al paso de la molécula de fundamental-excitado.
Detector. Detecta una radiación y a su vez la deja en evidencia, para su posterior estudio. Existen dos tipos:
a) Los que responden a fotones.
b) Los que responden al calor.
Registrador. Convierte el fenómeno físico, en números proporcionales al analito en cuestión.
Fotodetectores. En los instrumentos modernos se encuentra una serie de 16 fotodetectores para percibir la señal en forma simultánea en 16 longitudes de onda, cubriendo el espectro visible. Esto reduce el tiempo de medida y minimiza las partes móviles del equipo.
Hay varios tipos de espectrofotómetros, tales como: