La cromatografía en general se trata de un método de separación de componentes en una mezcla por las diferencias de afinidad (polar o no polar) por la fase estacionaria de la columna, diferencias en tamaño (cromatografía por excrusión), intercambio de iones (cromatografía de intercambio iónico), afinidad por enlaces químicos débiles (cromatografía de afinidad).
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Técnica cromatográfica de líquidos de alta eficiencia. Se basa en la diferencia de afinidades de los componentes de una mezcla por la fase estacionaria. Cabe mencionar que la composición de la fase móvil también influye en la afinidad, ya que se puede modificar los factores de retención.
Usos
En la cuantificación de contaminantes químicos, en química analítica y bioquímica.
Partes
Las partes principales de un equipo de HPLC son: Una válvula de mezcla de disolventes, bomba, válvula de inyección de la muestra, columna cromatográfica y detector.
Tipos
Fase normal: Fase estacionaria polar y una fase móvil no polar. Fase reversa: Fase estacionaria no polar y fase móvil de polaridad moderada.
Proceso
La muestra a separar se introduce por el inyector, en el cual se incorpora la fase móvil; la muestra problema y la fase móvil entran a la columna, la cual está recubierta por la fase estacionaria. La fase estacionaria posee grupos químicos que interaccionan con los componentes de la muestra, de tal manera que el componente que interaccione más fuertemente con la fase estacionaria saldrá al último y el que sea menos afín será el primero en salir. Para cada tipo de muestra se pueden utilizar detectores, que son capaces de identificar los componentes de la muestra e indicar el tiempo de retención.
